[问题] 请问进行细菌 真菌 及古细菌菌种鉴定 NGS或MOLDI

楼主: LUSRICH (ININ)   2018-01-18 01:53:08
请问进行细菌 真菌 及古细菌菌种鉴定时,
该选择
NGS或MOLDI -TOF呢
送验之样本用这两种方式测到不同的结果
故有此困惑,先感谢版大们之解惑了!!
作者: sunnylaba (laba)   2018-01-18 08:18:00
可以po到Biotech版问看看
作者: rossy (Rossy)   2018-01-18 12:36:00
NGS看基因体序列 MALDI-TOF看蛋白质 一般都先定序然后做Phylogenetic tree去看看这些菌属于哪一类
作者: ChesterYeah (YA01)   2018-01-18 13:08:00
Maldi-tof 你目的要做什么?前处理是?没有target 就没有特定要看什么的话,你只会看到一些不知道是什么的东西这些东西不只会是蛋白质maldi told 要看核苷片段也是可以的,需要比对数据库看蛋白表现就需要水解,电泳或否,上机,比对数据库
楼主: LUSRICH (ININ)   2018-01-18 21:49:00
感谢版大们回复我送验的样本是含多种未知菌的复合样本故先送NGS检测后验出其中有肠球蔨属之粪肠球菌,于是委托厂商以肠球蔨属的培养基分离,并再以malditof蛋白图谱去鉴种作二次确认,结果打出来的93个点都显示是另一种菌:耐久肠球蔨,接下来就卡关了 板大们建议以何种方式往下验证呢?感激不尽
作者: ChesterYeah (YA01)   2018-01-19 08:46:00
93个点 你是指maldi 的plate还是?以及处理方式?
楼主: LUSRICH (ININ)   2018-01-19 17:18:00
C大您好 感谢您 我刚刚与厂商确认了这个问题我们当时系以肠球蔨属培养基上的colony们挑了93个点打哦第94个样本以Ecoli当对照
作者: ChesterYeah (YA01)   2018-01-19 17:36:00
活菌直接上机吗?还是有萃取?前提是你选择培养基上colonies 是纯菌株,然后有无萃取步骤或是直接混基然后同一盘上面的点最好也挑去做colony PCR 确认一下有种情况是看似single colony 但却是重叠若不是,基本上Maldi都只能当作佐证;NGS就看做多深

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