妹仔~ 让曾经度过漫漫"西方人生"的姐姐来回你一下
从你的状况我看到几个关键字
1. 电泳跑不动 =>running buffer pH和浓度对不对
电压设定够不够强
2. 只要一小时你跑了12小时=> 电压到底对不对啊??
先假设你的stacking gel有跑过去, 在separating gel卡关
=>separating gel浓度过高
如果是连stacking gel都跑很慢=>胶体浓度肯定有错
3. 染完的胶全部碎掉=>妳配的胶肯定有问题 浓度太高太硬 才会碰撞就碎光光
(如果是浓度太低 那会变成鼻涕糊)
4. 胶台会漏=> 置胶器用久了会这样是正常的
先检查玻璃有没有破掉或缺角
底下海绵有没有放平整
最重要的绝招 上面夹子夹好后再插一根blue tip (让他用力夹~~~~)
然后 用tip加入1mL 酒精 看他会不会漏
如果漏了就重夹 不会漏就把酒精倒掉 再接着继续做胶
5. 如果妳的漏是指跑胶的时候 两片胶中间的buffer会跑到外面
=>请浪费buffer 把内外都加到一样高的水平面 就不会漏了
或是在外层那里放一块冰保/50mL离心管加水制的冰 让外层跟内层的水平面等高
实验就是这样 越急越容易出错......
所以姐建议你先去吃晚餐 洗个澡 看一下结衣整理一下心情
明天拿出你的protocol 把所有buffer 亲自重新配过
然后再做一次 这次先不要放样品
只单跑marker 确定这次做的胶和buffer可以了 再开始跑你的样品
姐曾经买的是整组配好的各种buffer
结果还是跑出富士山 就因为同事分装时搞混+标错.... 所以当然配出一坨没办法用的胶
做实验最好从一开始的buffer就自己配一套 不要混用!!
最后 姐劝你好好诚实的告诉老师你失败了 态度要低
实验失败绝对有原因 而且在你 不要急着澄清说你都有照做
(就算是buffer前人配错 但你没事前check 所以还是算你的)
有时候逃避很可耻但有用 但在实验室不但没用还会被黑 (茶)
加油啦~
ps. 我还以为我来到生科版.......囧
※ 引述《chith (74)》之铭言：
: 明明只是个简单的SDS
: 为什么可以出那么多状况
: 为什么电泳跑不动
: 为什么无论我怎么装它都会漏水
: 明明只要一小时的东西我用起来跑了快要12小时
: 为什么染完的胶全部碎掉变成一坨
: 有好多人在等我的实验结果
: 大家都要做报告
: 大家都准备了样品给我跑胶
: 我居然跑到胶碎掉了
: 也已经没有多余的样品重做了
: 到现在还不敢跟老师说我又搞砸了
: 不知道该怎么跟同学交代话花三个星期做的实验居然在最后ㄧ步骤失败了
: 好害怕......
: 好想哭......