大家好，想分享一些所学，请不吝指教^^
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本文为实习期间所学分享，以十字花科蔬菜抗黑腐病育种为例，参考《台湾十字花科黑腐
病菌侦测及防治》及《远缘杂交育种障碍及克服策略》等文章整理而成，并感谢凤试所邱
女士详加指导。由于笔者对于育种方面较为陌生，若文章有不对之处还请多加指点。
1. 育种目的：Xanthomonas campestris pv. campestris引起的十字花科黑腐病是世
界性的重要病害，抗黑腐病可从许多方面着手，如种子检定、种子处理、田间卫生及轮作
等。育成抗黑腐病品种亦为方法之一，然已知之甘蓝、花椰菜、青花菜、芥蓝等十字花科
蔬菜尚未发现具有抗黑腐病基因之原种，需借由远缘杂交技术引入小白菜、芥菜抗黑腐病
品种之基因，以育成新的抗病品种。
2. 远缘杂交之挑战：杂交育种一般采用无杂交障碍的种内材料为亲本，远缘杂交则将
亲本扩大到种间（interspecies）或属间（intergenus）的层次。远缘杂交会产生的障碍
，以十字花科为例，十字花科芸苔属作物可分为三大类-甘蓝类、白菜类及芥菜类，其染
色体数各不相同。甘蓝类的甘蓝、花椰菜、青花菜、芥蓝之染色体为2n=18；白菜类的小
白菜之染色体为2n=20；黑芥类的芥菜之染色体为2n=36。不同类（如，以甘蓝类为母本，
小白菜或芥蓝为父本）杂交后，由于染色体同源性低，可能发生（1）受精前：亲本杂交
不亲合，花粉在柱头无法萌发或伸长受阻；（2）受精后：杂种胚败育，种子无法形成；
（3）成株后：杂交种植株稔性低或不稔，为此育种过程中需应用许多技术以达成育种目
标。
3. 远源杂交技术
(1)蕾期授粉：避免自交/杂交不亲合，可利用蕾期授粉方式，于柱头尚未形成花粉萌芽抑
制物质时加以)授粉，其他如生长调节剂、氯化钠、二氧化碳等处理亦可提高授粉成功率
。蕾期授粉之操作细节依授粉者习惯各有不同，此处以芥菜为例，简述如下：
A. 选定父本，开花前套袋避免其他花粉沾染。
B. 以酒精消毒镊子（避免其他花粉沾染），摘取父本花朵，放置于培养皿等容器中。
C. 母本部分，以镊子除去已开、柱头已露出或过小的花苞，并除去花序生长点避免新花
苞产生。留下饱满健康、未打开之花苞，以镊子除去花瓣。
D. 取父本花朵，将花粉沾上柱头、套袋保护，1~2日后取下。
(2)胚拯救：授粉成功后多数杂交胚会败育死亡，故不等种子成熟即采收未成熟胚进行培
养（胚拯救）。胚培养之操作过程于不同实验室操作细节各有不同，简述如下：
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A. 根据不同品种特性于适当时机采收未成熟胚。
B. 酒精浸润约10秒后以清水冲洗，再以0.5%次氯酸钠消毒10分钟，于无菌环境洗清五次
。
C. 在显微镜下切开果荚，挑出未成熟胚，植入培养基。胚龄越小培养的难度越高，较成
熟的胚较易培养，但是也可能已发生败育，时机需自行记录掌握。未成熟胚依外观可分为
饱满、不饱满及干瘪三种状况，越成熟可能越干瘪，根据询问，不饱满至干瘪的胚成活率
可能较高，但因品种而异。
D. 以接种环将胚种入培养基，移入遮光环境进行培养，若胚成功萌发则移入弱光环境，
最后移至正常灯照下培养。
E. 植株成长后可利用微体扦插方式进行继代：取出地上部、切除叶片，将侧芽或顶芽重
新种入培养基。
(3)克服不稔性：远缘杂交株成功长成后仍有稔性低或不稔问题