Lab姆咪 鱿鱼丝 布比 进来

楼主: jason841207 (煞气a妹控)   2019-05-16 13:28:09
Effects of the pH Dependence of
3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium Bromide-Formazan
Absorption on Chemosensitivity Determined by a Novel Tetrazolium-based Assay
反正重点就是
MTT主要透过
被活细胞上的粒线体 上面的电子传递
将化合物还原成有颜色的结晶体
每种细胞株再加入固定量的MTT dye后
相同时间细胞能产生的最大结晶量有所不同
这取决于细胞的大小
细胞生长速度
培养液的种类等等
在细胞数较稀疏 或是pH值较高的情况下
结晶溶出来的颜色 在570nm有最大吸光值
但在细胞生长过密集 或是环境pH值较低
溶出的颜色在会变成吸光值在510nm有主高峰 570nm变成次高峰
所以为了突破细胞密集程度 与 环境pH值的限制
所以才要加pH10.5的 buffer
然后靠杯喔
我查了其他网站sorenson’s buffer都不是加sodium citrate
所以布比问一下你们老师 sodium citrate到底是干什么的
我很好骑
作者: ken890126 (靈魂奸商 路西法)   2018-05-16 13:28:00
哲维突然发这种文章有点不习惯
作者: LabMumi (实验室姆咪)   2019-05-16 13:32:00
蛤 你都要融甲饡出来测吸光度了 为啥pH变吸光峰值会变?是解离还是会分解?
楼主: jason841207 (煞气a妹控)   2019-05-16 13:34:00
影响溶解程度…的样子我也在想 为啥会从一个pick变两个pick总之就是细胞长太满或培养基太酸会让结晶溶不出来
作者: yulis (笨蛋 尤莉丝)   2019-05-16 13:38:00
不是磷酸盐就不能叫sorenson’s 吧 柠檬酸盐应该叫另一种名称了 不同盐基的buffer 名称就不一样
作者: LabMumi (实验室姆咪)   2019-05-16 13:39:00
那加buffer就是要控制后面pH过低融不出来的问题r 细胞长太多这问题应该不是萃取甲攒的时候改变操作条件就能解决的问题ㄅ?
作者: yulis (笨蛋 尤莉丝)   2019-05-16 13:40:00
因为细胞是活的 里面很多反应在进行着 pH变化会发生啥也还搞不清楚
楼主: jason841207 (煞气a妹控)   2019-05-16 13:40:00
还是他其实是在MTT行程阶段的时候加buffer 不是溶开结晶的时候加
作者: LabMumi (实验室姆咪)   2019-05-16 13:44:00
我看人家流程都是MTT+buffer弄成溶液去萃取阿 细胞培养环境pH变了那个琥珀三洨酶活性也不一样ㄅ?所以应该是加dmso下去前就有buffer惹修正一下 mtt+buffer去给细胞吃
作者: KurosawaBuby (夜羽大人的四号小恶魔)   2019-05-16 13:50:00
https://i.imgur.com/BmKMmSW.jpg 结果我后来发现我们用的结晶紫方法(右下)跟你们的MTT其实还是不同的(?
作者: yulis (笨蛋 尤莉丝)   2019-05-16 14:01:00
染的东西不一样啊 要看你要干嘛吧mtt染粒腺体看存活率 因为死细胞粒腺体没活性染布上去

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