================================译文================================
成功制造出对新型冠状病毒（SARS-CoV-2）突变株也有效的中和单株抗体
（观点）
・我们成功地从感染新型冠状病毒并在病情重症化后迅速康复生的病例中产出中和单克隆
抗体*1。 本抗体与病毒棘蛋白*2强结合，阻断病毒与靶细胞的受体（receptor）*3结合
，从而预防感染、抑制重症化。
・本抗体不仅能中和原始类型，还得知可以在低浓度下中和许多突变株*4，例如英国型（
Alpha型）、南非型（Beta型）、巴西型（Gamma型）和印度型（delta）。
・使用本抗体的中和抗体疗法不仅适用于疫苗效果不佳以及未接种疫苗的情况，也期待对
于感染突变株的情况也有防止重症化或预防感染的疫苗同等效果。
（概要说明）
由人类反转录病毒学共同研究中心熊本大学校区松下修三教授领导的研究团队从一例重
症后迅速恢复的新型冠状病毒感染（COVID-19）病例中分离出强力的中和单株抗体。抗体
与病毒结合并阻止病毒侵入细胞的作用被称为“中和”，中和抗体被称为是治疗药的根本
。 目前为止中和抗体已在世界各地被开发，但它们在临床上的有效性还不够。 此次开发
的抗体的中和活性不仅认为是世界上最强，而且具有格外结合活性的抗体，可望发挥临床
效果。这项研究是其由京都大学病毒与再生医科学研究所的小柳义夫教授开始，并由许多
共同研究者的合作下完成的。
此外这项研究的结果将于7月13日上午11点（美国东海岸时间）发表在科学期刊《Cell Re
ports》上。
此外，这项研究是在日本医疗研究开发机构（AMED）的“对于新兴再兴与感染症创新的
医药品研究开发推进研究事业”的支持下进行的。
[背景] 在新型冠状病毒 (COVID-19) 患者中，虽然已知20%会重症化 ，5%陷于重症化，
但目前还没有既定的治疗方法，一次性太多的重症病人住院治疗，恐怕会导致医疗崩溃。
迄今为止，快速的开发疫 苗也可能遏制大流行，但有报导称，目前的疫苗对突变株
（例如南非和印度株）无效并且正在蔓延。 而且，由于接种疫苗的效果因人而异，并且
仍有一定数量的未接种疫苗的人仍然存在，因此 COVID-19 大流行预计将持续一段时间。
针对这种情况，本研究团队考虑开发使用中和抗体作为预防感染和抑制病情恶化的治疗
方法。
【研究内容】
1 中和单株抗体的分离鉴定
从感染新型冠状病毒（SARS-CoV-2）重症化后痊愈的病例中，选取血清中具有强力的中
和活性的2病例，从末梢血B细胞*5中制作了抗体的复制（克隆） 。 接下来，检查了克隆
与病毒棘蛋白的结合活性，发现 1,102 个克隆中有 88 个具有活性。 此外，在88个克隆
中，检测了棘蛋白的受体结合位点(RBD)*6的结合活性，9个克隆显示出活性。 此外，在
88 个克隆中，使用表达 SARS-CoV-2 棘蛋白的假病毒*7 检测了中和活性，并选择了显示
显著活性的 5 个克隆。 （图1）。
https://i.imgur.com/sFNKiSV.jpg
2 分离克隆的中和活性评价
随后，对于上述其表现出中和活性的 5个克隆（6-74、3-5、8-92、10-121、6-74、3-5
、8-92、10-121、9-105)，进行了使用三种不同靶细胞的假病毒中和试验（图 2A）和使
用两种靶细胞的细胞融合抑制试验（图 2B）。 同样，在所有中和测试结果中，9-105抗
体（IC50：0.9至3.5 ng / mL）* 8中观察到强烈的中和活性。 8-92 和 10-121 抗体也
显示出可以与目前为止所报告的强效中和抗体匹敌的活性。 对RBD结合活性的分析表明，
9-105抗体具有异常强的结合活性（KD值*9：2.03x10-12M）。 在使用 SARS-CoV-2 的菌
斑抑制试验中，9-105 抗体显示出很强的中和能力，IC50 为 7.3 ng/mL（图 3）。
https://i.imgur.com/13fX4s8.jpg
3 对SARS-CoV-2突变株中和活性的评价
COVID-19 大流行是由于 SARS-CoV-2 突变株扩大感染。 已经报告了这些变种病毒对
目前使用的疫苗诱抗体的抗性。 作为突变株的代表英国株（B.1.1.7 株；Alpha 型）、
南非株（B.1.351 株；Beta型）和巴西株（P.1株；Gamma型）、丹麦 mink cluster 5株
的4 株是众所周知的。 本研究团队是制作导入各突变株的棘蛋白变异假病毒，并测量了
交叉中和活性（图）。
4A、4B）。 如图 4C 所示，英国突变株 B.1.1.7 和丹麦mink cluster 5 株由 9-105
抗体、10-121 抗体和 8-92 抗体与野生型大致相同的浓度被中和。 另一方面，来自南非
的 B1.351株和来自巴西的 P.1 株仅被 9-105 和 10-121 抗体中和。
9-105抗体的中和活性用于中和抗性最高的B.1.351菌株，也能在低浓度的 IC50 下中和：
0.021 μg/ml。 另外，虽然图中没有显示，对于这些天已经成为世界上的问题的印度株(
Delta) 也有 IC50：0.021 μg/ml中和的数据，这对于这些突变株来说是足够的。
可以说保持了中和活性。 另一方面，感染者血浆中的抗体（不包括得到本抗体的两例
症）在英国和丹麦株中表现出中和，但巴西株的中和能力降低，南非菌株在大多数情况下
并没有表现出中和活性。（图 4D）。
https://i.imgur.com/O1Z41LX.jpg
[结果] COVID-19 大流行是一种对现有疫苗具有抗性的突变株所带来的新阶段。本研究团
队从两例SARS-CoV-2感染重症后恢复病例中分离出4种具有强中和活性的单株抗体，并申
请了专利（申请号：日本专利申请号：202-1430 55）。 这两种抗体对于武汉型和欧洲型
（D614G）病毒，以及造成全球问题的英国（B.1.1.7，Alpha型）和南非（B.1.351，Beta
型），丹麦（mink cluster 5）、巴西（P.1、Gamma型）、印度型（B.1.617.2、Delta
型）变种在低浓度中显现强力的交叉中和活性，并认为在COVID -19 的大流行中可以成为
一张王牌。 特别是，9-105 抗体被认为与 SARS-CoV-2 受体结合位点强结合，并在低浓
度下阻止病毒生长（图 5）。 美国紧急批准的中和抗体，给药剂量为70-100mg/kg，成本
也是个问题，而这种抗体的中和活性很强，所以用量在1/100左右，就可以期望其效果。
https://i.imgur.com/nzYq9gk.jpg
[发展] 基于这项研究的结果，本校将考虑商业化中和抗体的可能性。2020 年 12 月与明
治集团签署了联合研究协议。对突变株进行中和活性，今年3月，我们提交了国内优先申
请。 未来，我们计划推进9-105抗体临床应用的基础研究和非临床研究。
[用语解说]
* 1 中和单株抗体：一种与病毒表面的棘蛋白结合并阻断靶细胞感染的抗体。
* 2 棘蛋白：病毒表面的突起。 当棘蛋白与靶细胞上的受体结合时，就会发生感染。
一种作为疫苗标靶的蛋白质。
* 3 受体：病毒感染时结合的靶细胞表面分子。 在 SARS-CoV 的情况下，它是 ACE2 蛋
白。
* 4 突变株：由于新型冠状病毒的流行蔓延而出现的具有显著突变的病毒株。 迄今为止
，英国菌株（B.1.1.7 菌株，α 型），南非毒株（B.1.351 毒株，β 型）、巴西毒株（
P.1 毒株，γ 型）和印度毒株（B.1.617 毒株，δ 型）已被确定为“应注意的变种”。
据报告，传染力提高，并获得了免疫的能力。
* 5 末梢血 B 细胞：淋巴球的一种。 识别病毒等病原体并分化为产生抗体的细胞。
* 6 受体结合位点 (RBD)：棘蛋白的一部分，与病毒受体结合，是许多中和抗体的靶点
。
* 7 假病毒：非增殖性病毒颗粒，在表面表达 SARS-CoV-2 棘蛋白，借由棘蛋白进入细
胞并作为标记的蛋白质。
* 8 IC50：可以中和50%病毒的浓度。
* 9 KD 值：表示蛋白质结合力。 越低，结合越强，越难分离。 大多数抗体针对抗原的
水平为 10-9 ～10-10M。
(论文情报)
论文名:Resistance of SARS-CoV-2 variants to neutralization by antibodies induc
ed in convalescent patients with COVID-19
著者:Yu Kaku, Takeo Kuwata*, Hasan Md Zahid, Takao Hashiguchi, Takeshi Noda, N
oriko Kuramoto, Shashwata Biswas, Kaho Matsumoto, Mikiko Shimizu, Yoko Kawanam
i, Kazuya Shimura, Chiho Onishi, Yukiko Muramoto, Tateki Suzuki, Jiei Sasaki,
Yoji Nagasaki, Rumi Minami, Chihiro Motozono, Mako Toyoda, Hiroshi Takahashi,
Hiroto Kishi, Kazuhiko Fujii, Tsuneyuki Tatsuke, Terumasa Ikeda, Yosuke Maeda,
Takamasa Ueno, Yoshio Koyanagi, Hajime Iwagoe and Shuzo Matsushita* (*Corresp
onding)
掲载志:Cell Reports
doi:https://doi.org/10.1016/j.celrep.2021.109385 URL:https://www.cell.com/cell
-reports/fulltext/S2211-1247(21)00783-X
================================原文================================
新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)の変异株にも 有効な中和モノクローナル抗体の作成
に成功
(ポイント)
・新型コロナウイルスに感染し、重症化后急速に回复した症例から、中和モ ノクロー
ナル抗体*1を作成することに成功しました。本抗体は、ウイルス のスパイク蛋白*2に
强力に结合し、ウイルスが标的细胞のレセプター(受 容体)*3に结合するのを阻止する
ことで、感染の予防、重症化を抑制する ことができます。
・本抗体は、従来型ばかりでなく、イギリス型( )、南アフリカ 型(ベータ型)、ブラジ
ル型(ガンマ型)、インド型( )など、 多くの変异株*4も低浓度で中和する活性があるこ
とが分かりました。
・本抗体を用いた中和抗体疗法は、ワクチンの効果が不十分な例やワクチン 未接种者
ばかりでなく、変异株の感染者に対しても、ワクチンと同等の重 症化阻止効果や感染
予防効果が期待されます。
(概要说明)
ヒトレトロウイルス学共同研究センター熊本大学キャンパスの松下修三特 任教授らの
研究グループは、新型コロナウイルス感染症(COVID-19)で重症 化后に急速に回复した
症例から、强力な中和モノクローナル抗体を分离する ことに成功しました。ウイルス
に抗体が结合して细胞へのウイルスの侵入を 妨害する効果を“中和”と呼び、中和抗
体は、治疗薬の本命と言われていま す。これまでも世界各国で中和抗体が开発されて
きましたが、十分な临床効 果が得られていません。今回开発した抗体は、中和活性が
世界でも最も强力 であるばかりでなく、桁外れの结合活性を持ち、临床効果が期待で
きる抗体 と考えられます。本研究は、京都大学ウイルス・再生医科学研究所の小柳义
夫教授を始めとした多数の共同研究者の协力によってなされました。
なお、本研究成果は、令和 3 年 7 月 13 日午前 11 时(米国东海岸时间)に 科学雑志
“Cell Reports”に掲载されます。
また、本研究は国立研究开発法人日本医疗研究开発机构(AMED)の“新兴・ 再兴感染症
に対する革新的医薬品等开発推进研究事业”の支援を受けて実施 したものです。
[背景] 新型コロナウイルス感染症(COVID-19)患者のうち、20%は重症化し、5%は
重笃な状态に陥ることが知られていますが、有効性の确立した治疗法はなく、 一度に
多くの重症患者の入院が必要となり、医疗崩壊につながることが悬念 されてきました
。また、异例の速さで开発されたワクチンによって、これま でのパンデミックは抑え
られる可能性がありますが、现行のワクチンが有効 でない南アフリカ株や、インド株
といった変异株の蔓延も报告されています。 さらに、ワクチン接种の効果には个人差
があることや、ワクチン未接种の人々 も一定数残ることから、COVID-19パンデミック
は、まだしばらく続くと考え られます。このような状况に対し、本研究グループは中
和抗体を用いた感染 予防、重症化抑制の治疗法开発を考えました。
[研究の内容]
1 中和モノクローナル抗体の分离同定
新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)に感染し、重症化后に回复した症例の 中から、血清
中に强力な中和活性を持つ 2 症例を选定し、その末梢血 B 细胞 *5 から、抗体のコピ
ー(クローン)を作成しました。次に、ウイルスのスパイ ク蛋白に対するクローンの结
合活性を调べ、1,102クローン中88のクローン に活性を认めました。また、88 クロー
ンのうち、スパイク蛋白のレセプター 结合部位(RBD)*6 への结合活性を调べたところ
、9 クローンに活性を认めま した。さらに、88 クローンのうち、SARS-CoV-2 のスパ
イク蛋白を発现したシ ュードウイルス*7 を用いて中和活性を调べ、有意な活性を示す
5 クローンを 选定しました。(図1)。
https://i.imgur.com/sFNKiSV.jpg
2 分离したクローンの中和活性の评価
続いて、上记で中和活性を示した 5 クローン(6-74、3-5、8-92、10-121、
9-105)について、3 种类の异なる标的细胞を用いたシュードウイルス中和试 験(図 2A)
、2 种类の标的细胞を用いた细胞融合阻止试験(図 2B)を行いま した。どの中和试験结
果も同様に、9-105 抗体に强力な中和活性を认めまし た(IC50: 0.9~3.5ng/mL)*8。ま
た、8-92 抗体と 10-121 抗体もこれまで报告 された强力な中和抗体に匹敌する活性を
示しました。RBD に対する结合活性 の分析を行うと、9-105 抗体は、桁外れの强力な
结合活性(KD 値*9:2.03x10- 12M)を持つことが明らかとなりました。また、SARS-CoV-2
を用いたプラーク 抑制试験でも 9-105 抗体は IC50:7.3ng/mL と强力な中和能を示し
ました(図 3)。
https://i.imgur.com/13fX4s8.jpg
3 SARS-CoV-2 変异株に対する中和活性の评価
COVID-19 パンデミックは SARS-CoV-2 変异株の感染拡大という新たな局面
に入っています。これらの変异株は、现在用いられているワクチンが诱导す
る抗体に対する抵抗性が报告されています。変异株の代表的なものとして、
イギリス株(B.1.1.7 株;アルファ型)、南アフリカ株(B.1.351 株;ベータ
型)とブラジル株(P.1 株;ガンマ型)、デンマークの mink cluster 5 株の
4 株がよく知られています。本研究グループは、各変异株のスパイク蛋白変
异を导入したシュードウイルスを作成し、交差中和活性を测定しました(図
4A, 4B)。図 4C に示すようにイギリス由来の変异株 B.1.1.7 株とデンマーク
由来の mink cluster 5 株は 9-105 抗体、10-121 抗体、8-92 抗体によって野
生型とほぼ同程度の浓度で中和されました。一方、南アフリカ由来の B1.351
株とブラジル由来のP.1株は、9-105抗体と10-121抗体にのみ中和されまし
た。9-105 抗体の中和活性は、最も中和抵抗性が高い B.1.351 株に対しても
IC50:0.021 μg/ml と低浓度で中和しました。また、図には示しませんが、最
近、世界で问题になっているインド株(
デルタ型
)に対しても IC50:0.021
μg/ml で中和するというデータが得られ、これらの変异株に対しても十分な
中和活性を保っているといえます。一方、感染者血浆中の抗体(本抗体が得
られた 2 症例は除外)は、英国株、デンマーク株には中和を示すものの、ブ
ラジル株の中和能は低下し、南アフリカ株にはほとんどの症例が中和活性を
示しませんでした(図 4D)。
https://i.imgur.com/O1Z41LX.jpg
[成果] COVID-19のパンデミックは、既存のワクチンに対して抵抗性をもつ変异株
の流行という、新たな局面を迎えています。本研究グループは、SARS-CoV-2 に感染し
、重症化后に回复した2症例から、强力な中和活性を持つ4种类のヒ トモノクローナル
抗体を分离し、特许を出愿しました(出愿番号:特愿2020- 143055)。これらのうち2抗体
は、武汉型、ヨーロッパ型(D614G)のウイル スに加え、世界的に问题となっているイギ
リス(B.1.1.7、アルファ型)、南 アフリカ(B.1.351、ベータ型)、デンマーク(mink clu
ster 5)、ブラジル (P.1、ガンマ型)、インド型(B.1.617.2、デルタ型)の変异株に対し
低浓 度で强力な交差中和活性を示し、COVID-19パンデミックに対する切り札とな りう
ると考えます。特に、9-105抗体は、SARS-CoV-2のレセプター结合部位に 强力に结合し
、低浓度でウイルスの増殖を阻止すると考えられます(図5)。 米国で紧急承认された中
和抗体が、70-100mg/kgで投与され、コストが问题で あるのに対し、本抗体は强力な中
和活性をもつことから、约100分の1の投与 量で効果が期待できると考えられます。
https://i.imgur.com/nzYq9gk.jpg
[展开] 本研究成果をもとに、本学は中和抗体の医薬品化の可能性の検讨に関して
共同研究契约を2020年12月に明治グループと缔结しました。変异株に対する 中和活性
について、本年3月には国内优先権出愿を済ませております。今后は、 9-105抗体の临
床応用に向けた基础研究、非临床试験を推进する予定です。
[用语解说]
*1 中和モノクローナル抗体:ウイルスの表面にあるスパイク蛋白に结合し、 标的细胞
への感染を阻止する抗体。
*2 スパイク蛋白:ウイルスの表面の突起物。スパイク蛋白が标的细胞の受容 体に结合
することで感染を起こす。ワクチンの标的となる蛋白质。
*3 レセプター(受容体):ウイルスが感染する际に结合する标的细胞の表面 分子。SARS-
CoV の场合、ACE2 蛋白である。
*4 変异株:新型コロナウイルスの流行拡大によって出现した、顕著な変异を 有するウ
イルス株。现在まで、イギリス株(B.1.1.7 系统、アルファ型)、
南アフリカ株(B.1.351 系统、ベータ型)、ブラジル株(P.1 系统、ガンマ 型)、インド
株(B.1.617 系统、デルタ型)が、“悬念すべき変异株”とし て认定されている。伝播
力の向上や、免疫からの逃避能力の获得などが报告 されている。
*5 末梢血 B 细胞:リンパ球の一种。ウイルスなどの病原体を认识し、抗体を 产生する
细胞へ分化する。
*6 レセプター结合部位(RBD):スパイク蛋白のうち、ウイルスのレセプタ ーに结合する
部分で、多くの中和抗体の标的部位である。
*7 シュードウイルス:表面に SARS-CoV-2 のスパイク蛋白を発现させた増殖 性のない
ウイルス用粒子で、スパイク蛋白を介して细胞内に入りマーカーと なる蛋白を発现す
る。
*8 IC50:50%のウイルスを中和できる浓度。
*9 KD 値:蛋白の结合力を示す。低いほど结合が强く离れにくい。多くの抗体 は、抗原
に対して 10-9~10-10M レベルである。
(论文情报)
论文名:Resistance of SARS-CoV-2 variants to neutralization by antibodies induc
ed in convalescent patients with COVID-19
著者:Yu Kaku, Takeo Kuwata*, Hasan Md Zahid, Takao Hashiguchi, Takeshi Noda, N
oriko Kuramoto, Shashwata Biswas, Kaho Matsumoto, Mikiko Shimizu, Yoko Kawanam
i, Kazuya Shimura, Chiho Onishi, Yukiko Muramoto, Tateki Suzuki, Jiei Sasaki,
Yoji Nagasaki, Rumi Minami, Chihiro Motozono, Mako Toyoda, Hiroshi Takahashi,
Hiroto Kishi, Kazuhiko Fujii, Tsuneyuki Tatsuke, Terumasa Ikeda, Yosuke Maeda,
Takamasa Ueno, Yoshio Koyanagi, Hajime Iwagoe and Shuzo Matsushita* (*Corresp
onding)
掲载志:Cell Reports
doi:https://doi.org/10.1016/j.celrep.2021.109385 URL:https://www.cell.com/cell
-reports/fulltext/S2211-1247(21)00783-X